金線蓮為蘭科開唇蘭屬植物,具有極高的觀賞價值和藥用價值,是我國民間一種重要的中草藥資源,在福建、臺灣等地應用的歷史十分悠久。由于野生金線蓮的自然繁殖率較低,加上人為的大量采挖,造成國內的野生金線蓮幾近枯...
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金線蓮為蘭科開唇蘭屬植物,具有極高的觀賞價值和藥用價值,是我國民間一種重要的中草藥資源,在福建、臺灣等地應用的歷史十分悠久。由于野生金線蓮的自然繁殖率較低,加上人為的大量采挖,造成國內的野生金線蓮幾近枯絕。因此,通過人工栽培,特別是采用組織培養技術對金線蓮進行繁殖,是保護其資源的有效手段。本試驗旨在尋求一條高效率、低成本、環保的規?;a途徑,努力為金線蓮的產業化提供技術保障。
1 材料與方法
1.1 供試材料
福建金線蓮,采用福建漳州地區品種,組培苗。
1.2 試驗方法
本試驗在濮陽市農業科學院組培實驗室進行,采用的誘導、增殖基本培養基為MS+蔗糖30 g/L+瓊脂8 g/L,pH值5.8;促根基本培養基為1/2 MS+蔗糖15 g/L+瓊脂 8 g/L,pH 值 5.8。 控制溫度(25±1)℃,光照時間 8~10 h/d,光照強度 1 500~2 000 lx。
1.2.1 不定芽的誘導和增殖 生長健壯的金線蓮,去根部、葉片后切成帶有1個腋芽或頂芽的莖段,接種到不同激素水平的MS培養基中培養,共設置8個處理(見表1)。每個處理接種10瓶,每瓶5個莖段,誘導過程中低光照(500~600 lx),60 d后觀察比較不定芽誘導效果及增殖效果,篩選出佳的分化培養基。
1.2.2 生根誘導 不定芽伸長至3~4 cm時,自基部切下,接種到生根培養基上,共設置6個處理(見表2),每個處理接種10瓶,每瓶5個不定芽。30 d后,觀察其生根狀況,篩選出佳的生根培養基。
1.2.3 組培苗移栽 幼苗在生根培養基上培養35~50 d,根長至3~4 cm時,將瓶苗搬到煉苗大棚或陰涼通風處。經7 d左右的適應性煉苗,便洗苗移栽。移栽基質為蛭石、草炭土、消毒園土按1∶1∶1的比例配制,并用l%~2%多菌靈噴淋消毒。
2 結果與分析
2.1 不定芽誘導及增殖試驗
莖段和頂芽接種到不同激素配比培養基中,10~15 d后莖段葉腋處開始分化出可觀察到的乳白色的不定芽,頂芽較腋芽更容易萌動,腋芽以叢生生長為主,頂芽則以伸長生長為主。
試驗結果表明 (見表1),芽體的分化與6-BA、NAA濃度有密切關系,一定濃度的6-BA、NAA對莖段和頂芽有促進分化和增殖的作用。在試驗的8個處理中,處理1、處理2、處理3和處理6的分化率均達到100%,且芽體生長狀況好,其中處理2(6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L)增殖系數大。
表1 不同激素濃度對不定芽分化的影響
2.2 生根誘導試驗
通過分析3個激素水平對金線蓮的促根結果可知(見表2),當NAA濃度為0.5 mg/L時促根效果比較好,生根率、根的數量和長度都達到較高的水平。接種到生根培養基后培養10 d左右開始生根,根從靠近培養基的節上長出1~3條,呈肉質狀。根比較短且不分支,其上有細密、乳白色的根毛?;钚蕴靠梢蕴嵩缟?,提高生根率,提高根的質量。加0.3%的活性炭可以使金線蓮的生根時間縮短3~5 d,生根率可以提高10%左右,同時可以有效地減緩根的老化。培養50 d左右,植株長至8 cm時可進行室外移栽。
表2 不同激素對生根的影響
2.3 組培苗移栽
煉苗后進行洗苗移栽,移栽后的管理非常重要,每天都要觀察,及時補充水分及養分,發現有異常及時處理。把金線蓮移至陰涼大棚內的專用花盆中,每盆栽植20株左右,大棚內溫度控制在20℃~28℃,使空氣相對濕度保持在70%~80%;以后每7 d噴1次1/4MS來補充養分;如遇有猝倒病則噴施多菌靈或托布津1 000倍液,3個月培養期后出苗,選擇根壯葉繁的15 cm高優良苗,采后用清水洗凈,用專用保鮮盒保藏于冰柜中或曬干成品。
3 結論與討論
(1)金線蓮屬陰性植物,性喜溫涼,在組培過程中,室內溫度在23℃左右時長勢很好,當氣溫超過28℃或低于18℃時,其生長會受抑制;而氣溫超過35℃時,會因蒸騰失水嚴重而死亡。
(2)在不定芽誘導和繼代增殖前期用微光培養,有利于金線蓮芽的分化,在增殖后期適當增強光照,會使芽體較粗壯,生根過程中加強光照,能提高苗的質量。
(3)試驗表明,一定濃度的6-BA、NAA對莖段和頂芽有促進分化和增殖的作用。其中6-BA 1mg/L+NAA 0.1 mg/L、6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L 處理對福建金線蓮的不定芽誘導效果較好,分化率均達到100%,且芽體生長狀況好。6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L處理對福建金線蓮不定芽增殖效果好,增殖系數達到6.14。在生根培養中,NAA 0.5 mg/L+活性炭0.3%處理的促根效果好,生根率可達98%。